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  • 20132-26
    制備膠體金分散顆粒的其他方法

    乙醇—超聲波還原法(Baigent和Muller,1980)(1)取1%AuCl3·HCl水溶液lml加入100ml雙重蒸餾水。(2)用0.2m01/LK2C03調pH至7.2,再加入lml無水乙醇。(3)用20KC、135W超聲波探頭浸入溶液內進行超聲振蕩,此法制備的顆粒為6~10nm。硼氫化鈉還原法(Tschopp等,1982)(1)取0.6ml1%氯化金水溶液,加入40ml預冷(4℃)雙蒸餾水。(2)再加入0.2mol/LK2C030.2ml。(3)邊攪拌邊加入新鮮配制...

  • 20132-23
    生物實驗室安全

    『安全』是進行任何實驗zui重要的考量,若不留意,經常會造成*的遺憾,因此,請遵守以下各項規定:1.請事先勘查緊急沖洗站、洗眼臺及滅火器的位置。2.請避免穿著涼鞋或拖鞋(腳趾不要裸露),并請穿著實驗衣。留長發者,在實驗進行前將頭發束好。3.在實驗室請勿吸煙、化妝、嚼口香糖、吃東西、喝飲料。食物不可存放于實驗室的冰箱中。4.實驗前后請將工作區域清理擦拭干凈,實驗中打翻任何藥品試劑時,要隨時清理;離開實驗室前請記得洗手。5.使用刻度吸管時,切勿用嘴吸取,請用安全吸球或吸管唧筒。6...

  • 20132-23
    微量移液器之拆解與組裝方法步驟

    微量移液器(micropipet)是進行生化實驗或分子生物學實驗的*工具,然而使用方法的正確與否,以及微量移液器的準確性,都直接影響了實驗結果的正確性,故請對你持有之微量移液器作深入的認識。本實驗室所使用的微量移液器為GilsonPipetmanP系列,包括P1000,P200,P20等。以下使用方法及注意事項,部份取材自原廠所附說明書,請詳讀之后才進行實驗。1)請參照圖1.1,認識微量移液器每一部份組件之位置及名稱。2)將D(ejector)取下,C(connectingn...

  • 20132-21
    瓊脂糖膠體電泳 (agarose gel electrophoresis)

    儀器用具:迷你電泳槽及鑄膠器(MupidII);UVtransilluminator及影像分析系統;防護面罩藥品試劑:瓊脂糖粉末(agarose,lowEEO)1×TAE電泳緩沖液(40mMTris-acetate,1mMEDTA,pH8.0):由50×TAE(每1L含242gTrisbase,57.1mLglacialaceticacid,100mL的0.5MEDTA-8.0)稀釋使用。10×追蹤染劑(0.25%bromophenolblue,0.25%xylenecyan...

  • 20132-21
    DNA限制酶分析與切割

    儀器用具:37℃及65℃水浴或恒溫槽藥品試劑:質體pBluescriptIISK(-)限制酶:BamHI,PvuII及ScaI(濃度均為10units/μL,Invitrogen)10×Reactionbuffer6(0.5MTris-HCl,pH7.4;60mMMgCl2;0.5MNaCl;0.5MKCl)無菌水方法步驟:1)取7支微量離心管,依下表所列體積(單位μL)依序加于管壁不同位置上。◆每次吸取限制酶時,請換一支新的微量移液器頭以免造成污染。總體積為20μL,短暫離...

  • 20132-19
    Colony hybridization重組質體的檢定

    方法步驟:1)前一天轉形的培養皿,當菌落長至約0.5mm大小時,將培養皿移至4℃放置1h。2)準備一張無菌的硝化纖維濾膜,以鉛筆在邊緣標上組別。◆請戴手套后再拿取濾膜!3)打開培養皿蓋子,以兩支扁平鑷子將濾膜兩邊夾住,輕輕覆蓋在菌落上方,盡可能避免有氣泡產生。◆注意!濾膜覆蓋上去后就不要再移動!4)等濾膜*濕透后,以針頭在濾膜邊緣戳洞做記號(至少做三個記號)。小心把濾膜掀起,菌落朝上放置在LB/Amp/IPTGplate上。蓋上蓋子,在37℃培養2~4h,以誘導啟動T5pro...

  • 20132-19
    Histochemical detection重組質體的檢定

    儀器用具:平端鑷子藥品試劑:Nitrocellulose濾膜LB/Amp/IPTG/X-Glucplate(LBplate添加100μg/mLampicillin,0.2MIPTG,50μg/mLX-Gluc)方法步驟:1)前一天進行轉形的培養皿,當菌落長至約0.5mm大小時,將培養皿移至4℃放置至少1h。2)準備一張無菌的硝化纖維濾膜,以鉛筆在邊緣標上組別。◆請戴手套后再拿取濾膜!3)打開培養皿蓋子,以兩支扁平鑷子將濾膜兩邊夾住,輕輕覆蓋在菌落上方,盡可能避免有氣泡產生。◆...

  • 20131-16
    酶活性分析法檢定蛋白質

    方法步驟:1)吸取20μL的蛋白質樣本,小心注入微量滴定盤中,避免氣泡產生。2)每一樣品槽加入200μL基質液,混合均勻;可用燒熱的接種環去除氣泡。3)靜置約1~2min,顏色開始加深,然后加入30μL終止液。反應時間的長短,要以樣本中的酶活性大小來做調整。因為我們只測定色析法各分劃的相對酶活性,因此并不加終止液。4)以ELISA光度計測定波長415nm的吸光值。酶活性單位的測定:a.以上步驟,只可測定GUS活性的相對大小,對色析法所得到的各個分劃進行偵測,相當方便,但并非酶...

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